1. Биотехнология ғылым және өндіріс саласы, даму тарихы, биотехнология бығыттарына анықтама беріңіз.
Гепариннің әсер ету механизмі қандай?
жүктеу/скачать 99,31 Kb.
|
1. Биотехнология ылым ж не ндіріс саласы, даму тарихы, биотехн
ашы ты тан о ыту а арнал ан
- Бұл бет үшін навигация:
- 18 Төмен молекулалық гепариндерді алудың негізгі әдістері қандай
- Streptomyces kurssanovii-ден ферменттер кешенінің көмегімен ферментативті деполимеризация арқылы
| 17.Гепариннің әсер ету механизмі қандай?
Гепариннің әсер ету механизмі, ең алдымен, оның тромбин, ixa, Xa, XIa, Xia белсендірілген коагуляция факторларының ингибиторы АНТИТРОМБИН III - мен байланысуына негізделген (тромбинді және белсендірілген x факторын тежеу қабілеті ерекше маңызды). Бүйрек қан ағымын арттырады; ми тамырларының қарсылығын арттырады, ми гиалуронидазасының белсенділігін төмендетеді, липопротеинлипазаны белсендіреді және гиполипидемиялық әсерге ие. Вена ішіне енгізу кезінде қанның ұюы бірден дерлік баяулайды, бұлшық еттке енгізу кезінде - 15-30 минуттан кейін, тері астына енгізген кезінде - 20-60 минуттан кейін, ингаляциядан кейін максималды әсер - бір тәуліктен кейін; антикоагуляциялық әсердің ұзақтығы тиісінше - 4-5, 6, 8 сағат және 1-2 апта, терапиялық әсер - тромбоздың алдын алу - едәуір ұзақ сақталады. 18 Төмен молекулалық гепариндерді алудың негізгі әдістері қандай? Артериялық және веноздық тромбоэмболиялық асқынуларды емдеу және алдын алу үшін қазір гепарин кеңінен қолданылады. Клиникалық зерттеулердің нәтижелері гепариннің жедел миокард инфарктісінде, тұрақсыз стенокардияда, төменгі аяғындағы терең тамыр тромбозында және кейбір басқа жағдайларда тиімділігін көрсетеді. Дегенмен, антикоагулянттық әсердің ауырлығын дәл болжау мүмкін еместігі қанның ұю уақытын немесе белсендірілген ішінара тромбопластин уақытын анықтау үшін тұрақты және жиі зертханалық зерттеулерді қажет етеді. Сонымен қатар, гепариннің жанама әсерлері бар, атап айтқанда, ол остеопорозды, тромбоцитопенияны тудыруы мүмкін, сонымен қатар тромбоциттердің агрегациясына ықпал етеді. Осыған байланысты «фракцияланбаған» гепариннен оқшауланған төмен молекулалық гепариндер (ТМГ) әзірленді. Алу әдістері: Төмен молекулалық салмақты гепариндерді алудың алғашқы тәсілдерінің бірі Flavobacterium heparinum тараған гепариназаны қолдану арқылы фракцияланбаған гепаринді ферментативті деполимеризациялау жұмыстары болды. Ол үшін молекулалық массасы 17,3 кDа болатын натрий гепарині пайдаланылды.Фракцияланбаған гепарин 0,1 М натрий ацетатында және 0,01 М кальций ацетатында ерітілді. Ерітіндіге 0,1 М натрий ацетатында ерітілген 1050 МЕ/мг белсенділігі бар гепариназа қосылды. Қоспа тұрақты араластыра отырып, 30 ° C температурада термостатталған. Орташа молекулалық салмағы шамамен 5 кДа болатын төмен молекулалық салмақты гепариндер алынды. Технологияның тиімділігін арттыру үшін ферменттердің иммобилизацияланған кешенінде фракцияланбаған гепаринді деполимеризациялаудың биотехнологиялық процесін қолдану ұсынылады. Тәжірибеде ең көп қолданылатын дәрілік заттар дальтепарин, тинзапарин және эноксапарин натрий заттарына негізделген, оларда көрсеткіштердің ең кең ауқымы бар. Силохромда иммобилизацияланған Streptomyces kurssanovii-ден ферменттер кешенінің көмегімен ферментативті деполимеризация арқылы жоғары молекулалы гепариндерден төмен молекулалы гепариндерді алу әдісі ұсынылған: иммобилизацияланған фермент 1:1, суспензия араласады, иммобилизацияланған препарат центрифугалау арқылы бөлінеді, жуылады, жуу сұйықтығы супернатантқа қосылады және сефадекс 6-10 бағанға тұзсыздандырылады, алынған өнім лиофилизацияланады. Өнертабыс әдістің арзандауын қамтамасыз етеді. Фракцияланбаған гепариндерді молекулалық массасы 3 кДа-дан аз фракциялардан босату және өнімдердің суда және органикалық суда әртүрлі еруіне байланысты деполимеризация мен фракциялауды жүзеге асыру мақсатында оларды алдын ала ультрафильтрациялау негізінде төмен молекулалық салмақты гепарин алудың қызықты әдісі. фазалары. Гепариннің ауылшаруашылық еріткіштерде ерімейтіндігіне қарамастан, төрттік аммоний катиондары бар комплекстер белгілі бір жағдайларда дихлорметанда ериді. Деполимеризация үшін шошқаның шырышты қабығынан бөлініп алынған молярлық массасы 17 кДа фракцияланбаған гепаринді коммерциялық препараттар қолдандық. Натрий гепарин суға бөлініп, молекулалық салмағы 3 кДа-дан аз фракцияларды толығымен жою үшін қуыс талшықтарда сүзіледі. Концентрлі ерітіндіге көлемге дейін натрий хлориді және дихлорметандағы 7,5% бензстоний хлоридінің ерітіндісі қосылады. Ерітіндіні 0,17 М натрий хлоридінің сулы ерітіндісімен араластырады. Содан кейін 20-25 ° C температурада қоспаға бензилхлорид қосылады. Қоспа температурада 6 сағат бойы араластырылады. Содан кейін қоспаға бензилтриметиламмоний гидроксиді қосылады және араластыру 3 сағат бойы жалғасады. Араластыру аяқталғаннан кейін бензилгепаринат ерітіндісіне 2 н натрий гидроксиді ерітіндісін қосады және 2 сағат бойы 4 ° C температурада ұстайды. Деполимерлену реакциясы 1 н тұз қышқылын қосу арқылы тоқтатылады. Алынған өнім бірінші хлоридті жою үшін шектік шегі 1 кДа болатын ультрафильтрацияға ұшырайды және өнім лиофилденеді. Бұл кезеңде олигосахаридтерді сулы ерітіндіден төмен молекулалы гепаринді метанолмен, ацетонмен, этанолмен натрий тұзы түрінде тұндыру арқылы төгуге болады. Айта кету керек, ультрафильтрация гепариндерді әртүрлі төмен молекулалық қоспалардан, соның ішінде заттың белсенді фракцияларының мақсатты концентрациясынан тазарту әдісі болып табылады. жүктеу/скачать 99,31 Kb. Достарыңызбен бөлісу:
|