Реферат создание моноклональных антител (мка) привело к рево
КЛАССИЧЕСКИЕ МОНОСПЕЦИФИЧЕСКИЕ
жүктеу/скачать 1,33 Mb. Pdf көрінісі
|
monoklonalnye-antitela-ot-sozdaniya-do-klinicheskogo-primeneniya (1)
ЕҚБҮ, 2б-Силлабус ДБ 7 кур каз, Маяқұм ауылдық мәдениет үйінің 2022 жылғы желтоқсан айының күзетшілер кестесі, DOC-20231110-WA0001.
- Бұл бет үшін навигация:
- Принципиальная схема получения моноклональных антител.
| КЛАССИЧЕСКИЕ МОНОСПЕЦИФИЧЕСКИЕ
МОНОКЛОНАЛЬНЫЕ АНТИТЕЛА Решение проблемы было предложено в 1975 г. учеными Георгом Кёлером и Цезарем Мильштейном (рис. 1). Они разработали методику получения клеточных гибридов — гибридом. Гибридомы (гибридные опухолевые клетки) образуются в результате слияния лимфоцитов, полу- ченных от иммунизированных животных, с клетками мно- жественной миеломы костного мозга, культивируемыми in vitro . Необходимо отметить, что В-лимфоциты могут жить только в организме хозяина, а в искусственной питательной среде они быстро погибают. Длительное культивирование В-лимфоцитов вне организма невоз- можно. Наоборот, клетки плазмоцитарной опухоли (плазмоцитомы или множественной миеломы) хорошо культивируются и размножаются in vitro и их называют «бессмертными». В 1970-е годы немецкий иммунолог Георг Кёлер изучал генетическую изменчивость антител. Для иссле- дования было необходимо изолировать клон антитело- образующих клеток (АОК) — плазмоцитов (производных В-лимфоцитов). С целью реализовать проект Г. Кёлер прибыл в Англию, в лабораторию Ц. Мильштейна, из- учавшего клоны плазмоцитом, и они вместе разработали оригинальный подход к решению этой проблемы. Ученые решили получить соматический гибрид нормальной антителопродуцирующей и опухолевой клеток. В случае успеха такой гибрид унаследовал бы от нормальной В-клетки способность к синтезу антител, а от опухолевой — «бессмертие» и способность к не- ограниченному и бесконтрольному росту. Это им удалось осуществить путем создания гибридомной технологии [1]. Принципиальная схема получения моноклональных антител. Мышей интенсивно иммунизировали опреде- ленным антигеном — белком, бактериальными клетками или клетками животного происхождения. Когда в их крови появлялись антитела, у них удаляли селезенку, из которой готовили взвесь клеток (с большим содержанием В-лимфоцитов). Если к суспензии В-лимфоцитов, полученных из се- лезенки иммунизированных животных, добавить клетки плазмоцитомы и ПЭГ, то после инкубации, требующейся для слияния клеток, в системе находились следующие клеточные элементы: гибриды АОК и АОК (В-лимфоцитов и В-лим- фоцитов); гибриды АОК и клеток плазмоцитомы, оставшиеся свободными (не слившимися); АОК и клетки плазмоцитомы. Проблема заключалась в том, как отделить заданную гибридому от присутствующих в системе отдельных не- слившихся клеток и от гибридов иной специфичности. Для достижения этой цели авторы разработали специальную схему с отбором клеток в селективной пи- тательной среде, т. е. в среде, с помощью которой можно выделять желаемый клон клеток. Метаболическая селекция гибридов основана на том, что нормальные соматические клетки (В-лимфоциты) могут использовать два метаболических пути синтеза нуклеотидов (пуринов и пиримидинов): основной и ре- зервный. При жүктеу/скачать 1,33 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|