Алматы-2020 Қазақ Республикасының Білім және Ғылым Министрлігі
жүктеу/скачать 2,78 Mb. Pdf көрінісі
|
Жүнісжан А.Ж.-6
49, 5-апÑа ХимиÑлÑÒ Ð±Ð°Ð¹Ð»Ð°Ð½ÑÑ
- Бұл бет үшін навигация:
- 3.Дизоксинуклеотидүшфосфаттар қосындысы
- ПТР-дың қасиеттері
- Классикалық ПТР
| 2.Taq-полимераза
– температураға төзімді фермент, негізінен комплементарлы принципте 3` - соңына жабысады да, тізбекті құрастыруға кіріседі. 3.Дизоксинуклеотидүшфосфаттар қосындысы ( dNТP): dATP , dGNP, dTTP, dCTP , болуы керек. ДНҚ молекуласының екінші комплементарлы тізбегін Taq-полимераза ферменті арқылы синтездеуге қолданылатын «құрылыс материалы». . ПТР сатылары • Денатурация - ДНҚ-ны қос талшықты формасынан бірқалыпты нысанға ауыстыру, егер жоғары температуралардың әсерінен қосымша қосалқы базалық жұптар арасындағы сутегі байланыстары • Күйіп кету - праймерлерді бір жақты ДНҚ мақсатына қосу. Примерлар таңдалған фрагментті шектеп, ДНҚ-ның қарама- қарсылығынтолықтыратын етіп таңдалады. Күйіп кету Chargaff's complementarity ережесіне сәйкес жүзеге асырылады. • Ұзарту (синтез) - пракер синтезінен кейін Так полимеразы ДНҚ-ның екінші шоғырлануын примердің 3 'аяғынан аяқтайды Классикалық ПТР Классикалық форматтағы полимеразды тізбекті реакция. ДНҚ және ДНҚ құрамды микроорганизмдердің күдікті мутацияларын анықтауға қолданылған. Ол оның бастапқы фрагменті ген-спецификалық праймерлердің көмегімен амплифицирленеді. Реакцияның соңғы нәтижесі зерттелетін материалдағы ДНҚ нысанасының бар екендігін көрсетеді. Кері транскрипциясы бар полимеразды тізбекті реакция. РНҚ құрамды вирустардың геномының арнайы учаскелерін анықтау немесе нысана- геннің транскрипциясын зерттеу үшін, алдымен ревертаза ферментіменкатализдейтін қайтымды транскрипция реакциясын пайдаланып, РНҚматрицадан ДНҚ-көшірмесін алады. Осылайша синтезделген қосымша ДНҚлар ПТР-де ген-спецификалық праймерлер үшін матрицалар болып табылады. |