Алматы-2020 Қазақ Республикасының Білім және Ғылым Министрлігі

Әдіс нуклеин қышқылының белгілі бір үлескісінің қайталанып
отыратын таңдаулы көшірмеленуіне негізделген. Бұл үрдіс
ферменттердің көмегімен жасанды жағдайда жүзеге асады (in
vitro).
ПТР-ды іске асыру
:
ДНҚ-ны амплификациялаудан басқа 
ПТР нуклеин қышқылдарына әр түрлі әсер 
етуге мүмкіндік береді (мутация, ДНҚ 
фрагменттерін тұтастыру). Сонымен 
қатар, ПТР биологиялық және 
медициналық практикада кеңінен 
пайдаланылады, мысалы, мирастық немесе 
инфекциялық ауруларды анықтау, әкелікті 
орнату, гендерді клондау, жаңа гендерді 
бөліп шығару, т.б.

Реакция компоненттері
ПТР-ды ең қарапайым жағдайда
жасау үшін келесі
компоненттер керек болады:
⚫
Амплификация жасалатын ДНҚ үлескісі бар ДНҚ-матрица.
⚫
Талап етілетін ДНҚ фрагменті әр түрлі тізбектерінің ұштарына
комплиментарлы екі праймер.
⚫
Жоғары температураға тұрақты ДНҚ-полимераза - ДНҚ
полимеризациясын катализдейтін фермент.
⚫
Дезоксирибонуклеозидтрифосфаттар
(dATP,
dGTP,
dCTP,
dTTP).
⚫
Полимеразаның қызметіне қажетті Mg2+ иондары.
⚫
Реакцияға қажетті жағдайларды (pH, ерітіндінің иондық күші)
қамтамасыз ететін буферлік ерітінді.

ПТР-НЫҢ ЖҮРУІ ҮШІН ҚАЖЕТ 
КОМПОНЕТТЕР
1. 
Праймерлер.
Шамамен 15 -30 нуклеотидтерден тұратын, жасанды арнайы 
синтезатордың көмегімен синтезделетін қысқа олигонуклеотидтер. 
Праймерлер амплификация үшін керек. Праймер матрицалық ДНҚ 
молекуласының белгілі –бір бөлігіне комплементарлық принцип бойынша 
жабысып, ары қарай ДНҚ полимераза ДНҚ бөлігін синтездейді.

жүктеу/скачать 2,78 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: